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技術(shù)專題

紫外—可見分光光度分析法

發(fā)布日期:2014-07-08 點(diǎn)擊:1789

一、基本要求 
掌握:本章要求掌握分光光度法的特點(diǎn)、基本原理、測定方法及計(jì)算方法;分子吸收光譜與電子躍遷類型,物質(zhì)對光的選擇吸收與吸收光譜曲線,摩爾吸收系數(shù)與吸收系數(shù),吸光度與透光度,偏離朗伯-比爾定律的原因;掌握顯色反應(yīng)條件及光度測量條件的選擇;掌握紫外—可見分光光度計(jì)的主要部件,各部件的作用及儀器原理,主要類型及特點(diǎn);掌握差示分光光度法的原理、特點(diǎn)。
理解:物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與紫外吸收光譜的關(guān)系,吸收波長位移與分子結(jié)構(gòu)變化的關(guān)系;紫外—可見分光光度定量分析影響結(jié)果準(zhǔn)確度的各種因素。 
了解:了解紫外—可見分光光度法測定靈敏度和選擇性的途徑;雙波長分光光度法等其它分光光度法定量測定的方法;紫外—可見分光光度法在有機(jī)化合物的結(jié)構(gòu)解析方面的作用及在其他方面的應(yīng)用。 
二、 基本概念與重點(diǎn)內(nèi)容 
A概述 
1.紫外—可見分光光度法的特點(diǎn) 
靈敏度與準(zhǔn)確度較高;選擇性較好;設(shè)備簡單、操作簡便。 
2.分光光度法的發(fā)展過程 
目視比色法 光電比色法 分光光度法 
3. 分子的紫外—可見吸收光譜 
分子的紫外—可見吸收光譜是基于物質(zhì)分子吸收紫外輻射或可見光,其外層電子躍遷而成,又稱分子的電子躍遷光譜。紫外—可見分光光度法是基于物質(zhì)分子的紫外—可見吸收光譜而建立的一種定性、定量分析方法。 
4. 光的基本性質(zhì) 
5.物質(zhì)對光的吸收及吸收光譜 
6.紫外—可見吸收光譜與電子躍遷類型 
7.生色團(tuán)與助色團(tuán) 
B 光的吸收定律 
1.光吸收的基本定律(朗伯-比爾定律) 
2.吸光度與透光率、百分透光率之間的關(guān)系 
3.工作曲線的繪制與應(yīng)用 
4.吸光系數(shù)、摩爾吸光系數(shù)和桑德爾靈敏度 
5. 偏離朗伯-比爾定律的因素 
C紫外-可見分光光度計(jì) 
1. 分光光度計(jì)的主要部件 
2. 在紫外和可見光區(qū)進(jìn)行測量時(shí),分別選擇何種光源 
3. 單色器的主要元件 
光柵;棱鏡 
4. 分光光度計(jì)中的檢測器類型 
早期:光電池;光電管;光電倍增管。 
5.紫外-可見分光光度計(jì)的類型及特點(diǎn) 
D顯色測定試樣的制備和光度測定條件的選擇 
、 
1.顯色反應(yīng)及其影響因素 
2.測定讀數(shù)誤差和測定條件的選擇 
5.入射波長的選擇 
E 分光光度定量測定方法與其他應(yīng)用 
1.單組分的測定 
通常采用 A-C 標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量測定。 
2.多組分的同時(shí)測定 
3.紫外可見吸收光譜在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)解析中的作用 
了解共軛程度、空間效應(yīng)、氫鍵等;可對飽和與不飽和化合物、異構(gòu)體及構(gòu)象進(jìn)行判別。在有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)解析中,紫外可見吸收光譜沒有紅外吸收光譜提供的結(jié)構(gòu)信息多。 
4.紫外—可見吸收光譜中有機(jī)物發(fā)色體系信息分析的一般規(guī)律

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